ECL 发光液丨WB实验

ECL West Pico 超敏发光液

ECL West Pico

ECL West Pico 超敏发光液是一种增强型化学发光底物，可通过Western 印迹分析检测皮克至中飞克水平的蛋白，推荐用于常规的膜化学发光检测。

试剂组分 Components: 

试剂A: Art no: ECWP-A, 增强型鲁米诺溶液 (Enhanced Luminol Solution) 

试剂B: Art no: ECWP-B, 稳定过氧化物溶液 (Stabilized Peroxide Solution)

产品特点 Characteristics：

① 灵敏：皮克至飞克水平灵敏度

② 稳定性好：室温下，工作溶液可保持稳定 8 小时

③ 兼容性好：硝酸纤维素和 PVDF 膜

④ 信号持续长：6-24 小时

⑤ 一抗稀释浓度：1:1000~1:5000  (质量浓度：0.2~1.0 µg/mL)

⑥ 二抗稀释浓度：1:20000~100000  (质量浓度：10~50 ng/mL)

用法说明 Instruction:

使用底物进行Western Blot检测：

1. 清洗膜

蛋白质转移后，将印迹膜转印装置中取出，用去离子水洗涤膜5分钟，去除转移缓冲液。

2. 封闭膜

用DuraBlot™ Western Blot 封闭液 (如1×酪蛋白封闭液、1×无蛋白快速封闭液)在室温下摇晃封闭30-60分钟。或者，在2~8℃下静止封闭过夜。 

3. 孵育一抗

用一抗稀释液（或封闭液）稀释一抗浓度至1:1000~1:5000  (质量浓度：0.2~1.0 µg/mL)（或按照厂家推荐的稀释度），在膜上摇动孵育1小时，或在2-8℃下孵育过夜。

4. 洗涤膜

用洗涤液TBST、PBST或其他含有0.05% Tween 20的缓冲液清洗膜10分钟，重复洗涤2次。 

5. 孵育酶标二抗

用酶标二抗稀释液稀释酶标二抗浓度至1:20000~100000  (质量浓度：10~50 ng/mL)，在室温下摇动孵育印迹30分钟至1小时。

6. 清洗膜

用洗涤液清洗膜6次，每次5分钟，以彻底去除任何未结合的酶标抗体。

7. 准备底物

通过混合等量的底物A和稳定的过氧化物B成分来制备底物工作液(如将5毫升增强型鲁米诺溶液与5毫升稳定过氧化物溶液混合)。使用足够体积的底物以确保印迹膜被底物完全润湿，并且印迹不会变干(0.1 mL/cm2)。

8. 底物孵育

将膜与底物工作液孵育反应5分钟。 

9. 膜成像

① 从工作溶液中取出印迹，并将其置于塑料保护套或透明塑料膜中；

② 用无尘吸水纸除去多余的液体，并小心地压出印迹膜上的气泡；

③ 使用成像系统对印迹进行成像。

注意：本产品用于检测非常敏感，必须非常仔细的优化单个分析成分(抗体，偶联物等)，以尽量减少非特异性反应导致本底过高。

仅供科研使用或进一步用于检测试剂盒的生产。不能用于人体或动物！