Western Blot 封闭液

蛋白印迹封闭试剂

Western Blocking Reagent

Western Blocking Reagent基于马来酸缓冲液，含有10%（w/w）纯化的酪蛋白分子，用于稀释配制蛋白印迹封闭工作液、一抗或酶标二抗稀释液。产品适用于蛋白印迹检测实验，可饱和封闭印迹膜，降低本底，提高检测的灵敏度。

用法说明 Instruction:
试剂的准备：

1. 配制工作液/稀释液所需缓冲液：1×TBS缓冲液（50mM Tris, 150 mM NaCl, PH7.5）；

2. 配制蛋白印迹封闭工作液（1%的蛋白印迹封闭工作液）：

用1份Western Blocking Reagent加入到9份TBS中（如100mL+900mL TBS)，摇匀后作为 1%的蛋白印迹封闭工作液使用。

3. 配制一抗或二抗稀释液（0.5%的蛋白印迹封闭工作液）：

用0.5份Western Blocking Reagent加入到9.5份TBS中（如50mL+950mL TBS)，摇匀后作为一抗或二抗稀释液使用。

Western blot印迹膜封闭（示例）：
1. 蛋白转印固定；
2. 封闭：加入适量1%的蛋白印迹封闭工作液，20-37℃孵育一定时间，通常15-90分钟即可；2-8℃过夜封闭可能更佳。
3. 孵育一抗

用0.5%的蛋白印迹封闭工作液作为一抗稀释液稀释一抗至1μg/mL或其他适当浓度，在膜上摇动孵育0.5~1小时。然后用TBST洗涤液或其他适合的洗涤缓冲液清洗膜5分钟，重复洗涤3次。 

4. 孵育酶标二抗

用0.5%的蛋白印迹封闭工作液作为二抗稀释液稀释二抗至10ng/mL或其他适当浓度，在膜上摇动孵育0.5~1小时。然后用TBST洗涤液或其他适合的洗涤缓冲液清洗膜5分钟，重复洗涤3次。

5. 底物孵育及检测

在膜上加入适量的显色底物或者发光底物进行显色或成像，以进行下一步实验分析。

建议在上述各工作液中添加终浓度为0.1%（v/v）的ProCide™ 300液体防腐剂（货号：PC30）。

仅供科研使用或进一步用于检测试剂盒的生产。不能用于人体或动物！